技术原理
Edman降解法是蛋白质N端序列分析中非常广泛使用的方法。Edman降解测序是通过循环反应从蛋白质的N端开始逐个鉴定氨基酸的种类，从而对蛋白质的N端序列进行测定。每一个Edman测序反应包括3步：第一步是在碱性条件下，PITC与蛋白N端的游离氨基结合；第二步是在酸性溶液中，N端残基被切除；第三步是PITC结合的残基转化成为更为稳定的PTH残基，经过在线的HPLC分析，根据洗脱时间确定氨基酸种类。具体实验过程如下：1）在蛋白质测序前，蛋白样品首先经过SDS-PAGE的分离，保证样品的纯度；2）将SDS-PAGE上的蛋白样品转移到PVDF膜上，经过染色确定把蛋白条带切出；3）使用Edman测序仪对得到的PVDF膜上的蛋白样品进行分析。

 

蛋白质N端测序技术原理图

技术特点
l  操作简单方便
l  应用领域广泛
 
样品要求
l  样品需要量在1-10ug；
l  纯度最好能达到95%以上；
l  Buffer中不要使用表面活性剂，并尽可能降低溶液的盐浓度。
 
注意事项
l  请使用足量的干冰运输，并尽量选用较快的邮递方式，以降低运输过程中样品降解的可能性。
 
项目报告
l  实验步骤
l  质谱参数
l  质谱谱图
l  蛋白质N端测序的详细信息
 
蛋白质N端测序一站式服务
l  您只需下单-寄送样品
l  样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

*易算-明德正康联合服务