免疫共沉淀法(co-IP)

co-immunoprecipitation

免疫共沉淀,简写为Co-IP,通过靶向蛋白抗体,间接捕获与靶向蛋白结合的蛋白,广泛应用于蛋白相互作用的鉴定。作为免疫沉淀的延伸,Co-IP不仅可以捕获并纯化靶向蛋白,还能捕获通过天然相互作用与靶向蛋白结合的大分子。因此一个实验称为IP还是Co-IP,取决于实验的重点是靶向蛋白(抗原)还是二级靶向蛋白(互作蛋白)。免疫沉淀后的蛋白可以洗脱,并通过多种手段表征,如Western Blot和鸟枪法质谱分析,来测定相互作用蛋白的ID、结合亲和力、结合动力学以及发现靶向蛋白的未知功能。

作为一种强大的技术,Co-IP常常被生物化学家们用来探索蛋白-蛋白的相互作用。虽然Co-IP在方法学上直截了当,但是因为互相作用的不稳定性、非特异性结合以及抗体污染等原因,通过Co-IP鉴定蛋白相互作用并不容易。上述因素对蛋白相互作用的检测均有负面影响。借助经验丰富的科学家和技术人员,我们能提供更多关于蛋白相互作用研究的可靠信息。