技术原理
Edman降解法是蛋白质N端序列分析中非常广泛使用的方法。Edman降解测序是通过循环反应从蛋白质的N端开始逐个鉴定氨基酸的种类,从而对蛋白质的N端序列进行测定。每一个Edman测序反应包括3步:第一步是在碱性条件下,PITC与蛋白N端的游离氨基结合;第二步是在酸性溶液中,N端残基被切除;第三步是PITC结合的残基转化成为更为稳定的PTH残基,经过在线的HPLC分析,根据洗脱时间确定氨基酸种类。具体实验过程如下:1)在蛋白质测序前,蛋白样品首先经过SDS-PAGE的分离,保证样品的纯度;2)将SDS-PAGE上的蛋白样品转移到PVDF膜上,经过染色确定把蛋白条带切出;3)使用Edman测序仪对得到的PVDF膜上的蛋白样品进行分析。
技术特点
l 操作简单方便
l 应用领域广泛
样品要求
l 样品需要量在1-10ug;
l 纯度最好能达到95%以上;
l Buffer中不要使用表面活性剂,并尽可能降低溶液的盐浓度。
注意事项
l 请使用足量的干冰运输,并尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。
项目报告
l 实验步骤
l 质谱参数
l 质谱谱图
l 蛋白质N端测序的详细信息
蛋白质N端测序一站式服务
l 您只需下单-寄送样品
l 样品处理-上机分析-数据分析-项目报告
*易算-明德正康联合服务