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磷酸化+全蛋白组demo报告

磷酸:全蛋白组的报告结果,主要包括3部分内容:全蛋白组分析、磷酸化组分析、联合分析。以下具体来看下部分图表展示

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磷酸:全蛋白组的报告结果,主要包括3部分内容:全蛋白组分析、磷酸化组分析、联合分析。以下具体来看下部分图表展示

1)基于表达量的项目整体结果展示和差异蛋白统计分析

整体结果:Venn韦恩图展示组间交集蛋白和特有蛋白,PCA展示组内样本重复性和组间样本差异性,相关性热图展示整体蛋白表达量分布的定量一致性聚类

差异分析:火山图展示两组样本的上调和下调表达差异蛋白,基: 倍数 变化和p-value两个统计值,聚类热图展示差异蛋白在不同组/样本中的表达量情况

2)对差异蛋白做注释与富集以及互作网络分析,基: GO、KEGG pathway和STRING数据

GO功能分析:统计生物学过程、细胞组分和分子功能的蛋白质,对这些功能蛋白分别进行富集分析,根据p-value、Fold enrich和count等参数结果,寻找关键功能变化

KEGG通路分析:对蛋白进行新陈代谢、细胞过程,人类疾病等通路的注释和富集分析,同样根: p-value、Fold& enrich和count等参数结果,寻找关键通路变化 ,并且还提供相关图示

STRING蛋白互作网络分析:可视化蛋白已知或预测的相互作用信息,包括直接相互作用(物理结合)和非直接互作(功能相关),根据连通性等参数结果,寻找关键互作节点

1)考虑到磷酸化定量可能受到蛋白自身表达的影响,所以需要对磷酸化定量数据做以全蛋白组为背景的校正

2)整体磷酸化修饰组鉴定作图和差异磷酸化位点统 统计全蛋白组和磷酸化组的鉴定蛋白 Venn 图,以及磷酸化组在不同组间中鉴定到的磷酸化蛋白和磷酸化位点Venn图,并且展示了检测到的单磷酸化修饰及多磷酸化修饰形态占比。其他PCA和样本相关性分析如前文全蛋白所述

之后筛选差异磷酸化位点,比如筛: log2FC>0.58, p-value<0.05的磷酸化位点,对差异位点 绘制火山图和聚类热图等分析内容

3)差异磷酸化位点所属蛋白的功能分析

GO功能、KEGG通路、STRING网络等分析如前文全蛋白组所述: 本分析中是基于磷酸化差异位点所属蛋白进行生物信息学分析:蛋白本身不考虑差异

此外我们还会对差异磷酸化位点进行motif和KSEA分析

motif分析用于识别蛋白质酶催化序列中的短保守基序。这些motif通常反应特定的生化功能

激:底物富集分析(Kinase-Substrate Enrichment Analysis,KSEA),基于已知的底物的磷酸化水平变化来进一步推测激酶的活性变化。根据差异磷酸化肽段及其磷酸化修饰位点,分析其上游可能存在的调控 Kinase,形:kinase-substrate 网络,并:Kinase 进行打分。将 KSEA 分析中找到的上游 Kinase 根据 z-score 和显著:P 值,使用 kinhub (http://www.kinhub.org/) ,将其绘制在 kinase map 上。(目前该分析内容仅限人、大小鼠物种

1)差异统计: 取两组学共同蛋白,分别计算两组学样本的倍数 变化 ,九象限图展示两组学变化趋势相同或相反的蛋白(若一个蛋白包含多个磷酸化位点,取 log2FC 绝对值最大的) 对差异磷酸化位点所属蛋白和全蛋白组的差异蛋白进行Venn分析,展示各自共有和特有的差异蛋白

2)相关性热图和网络:对差异蛋白和差异磷酸位点进行相关性统计,并识别出显著相关的cluster,对Top3的cluster进行热图和网络绘制,展示这些蛋白/位点间的正相关或负相: 表达 以及相关性的强弱关系

磷酸化+全蛋白组demo报告资料图 1
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磷酸化+全蛋白组demo报告资料图 2
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磷酸化+全蛋白组demo报告资料图 3
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磷酸化+全蛋白组demo报告资料图 4
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