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Label-free DDA 定量蛋白质组

label free-DDA定量蛋白质组

Label-free DDA蛋白质组解决方案

非标记蛋白质组定量技术

Label-free蛋白组是对蛋白质酶解肽段直接进行LC-MS/MS分析的非标记技术,结合质谱数据依赖性采集(Data-dependent acquisition,DDA)模式分析样本中的蛋白组成(定性)和蛋白丰度(定量)。

该技术发展成熟,操作流程标准化,样本不受物种和样本类型限制,适用于解析非特异性酶切、糖基化修饰、未知修饰、未知序列等数据。

非标记技术
IP-MS蛋白鉴定
多肽组学
糖基化修饰
获取完整技术方案

核心技术优势

技术成熟的非标记蛋白质组解决方案

技术成熟度高

标准化流程,前处理自动化操作,数据解析简单

样本兼容性强

组织、细胞、体液、胶条、IP等多种样本类型支持

应用领域广

蛋白组、多肽组、糖修饰组、IP-MS等全面适用

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技术解决方案

四类专业应用方向的完整解决方案

蛋白质组分析

蛋白鉴定与定量解决方案

  • 高通量自动化蛋白提取与酶解

  • 高灵敏度质谱DDA扫描分析

  • 专业数据解析、质控和生信分析

  • 注:由于DIA数据覆盖度更深,目前蛋白组多采用DIA技术

送样要求

  • 组织样本:10-20mg

  • 细胞样本:≥1×10^6个细胞

  • 菌体样本:≥50μL沉淀

  • BCA定量蛋白总量20-50μg

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多肽组分析

内源性多肽谱全面解析

  • 各种样本类型前处理技术

  • 内源性多肽选择性分离(3kDa或10kDa)

  • 质谱DDA扫描结合database序列比对和De Novo测序

  • 多肽差异筛选,多肽所属蛋白功能富集

送样要求

  • 组织样本:10-20mg

  • 细胞样本:≥1×10^6个细胞

  • 血清/血浆样本:≥100μL

  • 多肽冻干粉:1mg

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糖基化修饰分析

糖基化位点和糖链解析

  • 完整糖肽高效富集技术

  • 高覆盖糖基化位点鉴定

  • 位点特异性糖链解析

  • 高达1700条完整糖肽/样本鉴定能力

送样要求

  • 蛋白总量:N糖肽≥300μg,O糖肽≥1mg

  • 动物组织:≥30-50mg

  • 植物组织:≥1g

  • 细胞样本:1-2×107个细胞

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IP-MS鉴定

互作蛋白高效鉴定技术

  • 三种酶解方式全面兼容IP样本类型

  • 高灵敏度质谱DDA扫描分析

  • 整体质控FDR、score、质量精度、漏切

  • 可设客户关注修饰,提供修饰鉴定

送样要求

  • beads沉淀(推荐):≥1管

  • 蛋白溶液:≥1管,提供buffer成分

  • 胶条样本:1份,2×10mm或4×5mm

  • 保存运输:-80℃保存,干冰运输,胶条可冰袋

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成功应用案例

DDA蛋白组、多肽组、IP-MS相关研究成果

细胞外囊泡蛋白组研究

JCI Insight | 2024

发现SFRP1在纤维化EVs中富集,缺失Sfrp1将抑制EVs促进肺纤维化的活性
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研究人员使用label-free DDA蛋白质组学分析了支气管肺泡灌洗液中EVs(BALF-EVs)的蛋白质组成,比较了博来霉素处理小鼠和对照组的差异。

研究发现107种蛋白质在纤维化囊泡中富集,其中,SFRP1在EVs中显著富集。缺失Sfrp1显著抑制了成纤维细胞的促纤维化作用。

107
EVs蛋白
SFRP1
治疗靶点

CoIP互作蛋白研究

Anal Bioanal Chem

结合亚细胞分离与CoIP-MS鉴定线粒体中的C1QBP相互作用蛋白
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研究开发了一种结合亚细胞分离与共免疫沉淀-质谱(CoIP-MS)的方法,以减少细胞组分的影响和假阳性结果。

成功识别并验证了C1QBP的新互作蛋白DLAT(丙酮酸脱氢酶(PDH)复合体组分),揭示C1QBP表达水平影响PDH活性,提供了C1QBP在线粒体中调控能量代谢的新见解。

CoIP-MS
方法
DLAT
互作蛋白

小鼠血清多肽组研究

Journal of Proteomics

感染弓形虫的小鼠血清内源性多肽变化的全新发现
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研究者从弓形虫急性感染、慢性感染及对照小鼠收集血清样本进行多肽组分析,以研究感染过程中内源性多肽变化。

共识别607种内源性肽,其中急性感染与其他样本差异明显。GO分析感染与对照小鼠血清差异多肽,发现其所属蛋白与生物调节和结合活性相关,为新型诊断靶点提供参考。

607
内源性肽
149
差异表达肽

送样指导手册

详尽的样本准备、保存与运输指南

下载送样指南

分析报告模板

完整的实验与分析报告模板

下载报告模板